細(xì)胞凍存失敗的原因，你知道嗎？

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細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵步驟。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。
隨著細(xì)胞被冷凍至冰點以下，懸液中冰晶和溶質(zhì)的濃度有所增加。如果冷卻過程中，胞內(nèi)水分可以滲出細(xì)胞，則可以減少胞內(nèi)冰晶。通常1℃/min的降溫速度可以促進此過程。但是，水分的喪失會導(dǎo)致細(xì)胞收縮，當(dāng)這種收縮達(dá)到一定程度，又會導(dǎo)致細(xì)胞活性的劇烈下降。冷凍保護劑，如甘油或者二甲基亞砜（DMSO），可以緩解這種效應(yīng)。細(xì)胞凍存的標(biāo)準(zhǔn)程序是在含有冷凍保護劑的培養(yǎng)基中，將細(xì)胞緩慢冷凍至–70℃，然后將凍存管轉(zhuǎn)移到液氮中以保持低于–130℃的環(huán)境。

5%-10%的甘油和DMSO是凍存保護劑。雖然DMSO對細(xì)胞有毒性，但是與甘油相比，其滲入細(xì)胞的速度更快，而且凍存重復(fù)性更好（而且細(xì)胞復(fù)蘇效率更好）。右旋糖酐系蔗糖是經(jīng)腸膜狀明串珠菌-1226(Leuconostoc mesenteroides)發(fā)酵合成的一種高分子葡萄糖聚合物，右旋糖酐-40（Dextran-40）別稱低分子右旋糖酐，右旋糖酐40的重均分子量（Mw）應(yīng)為32000～42000。右旋糖酐-40可以維持滲透壓和 PiH , 提供適宜細(xì)胞存活的介質(zhì)環(huán)境。
OriGen生物醫(yī)學(xué)公司成立于1997年，是一家總部總部位于德克薩斯州*。OriGen 為細(xì)胞培養(yǎng)和冷凍保存提供關(guān)鍵性的器材。制造的產(chǎn)品非常適用于組織存儲，細(xì)胞培養(yǎng)/存儲，干細(xì)胞擴增和長期冷凍保存，并且特別適合于液氮冷凍保存。

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