CPT單核細(xì)胞準(zhǔn)備管是一種專門設(shè)計用于從全血中分離單核細(xì)胞的采血管。它利用差速離心和密度梯度離心的原理,通過特制的分離介質(zhì)和抗凝劑,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分層和分離。為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,正確使用單核細(xì)胞準(zhǔn)備管至關(guān)重要。
1.準(zhǔn)備工作
檢查采血管:在使用前,務(wù)必檢查單核細(xì)胞準(zhǔn)備管的密封性和有效期,確保采血管未過期且密封良好。
準(zhǔn)備設(shè)備:準(zhǔn)備好適合的離心機(jī)、無菌注射器或移液管等必要設(shè)備,并確保所有設(shè)備均處于良好的工作狀態(tài)。
2.血液采集
靜脈采血:使用標(biāo)準(zhǔn)的靜脈采血方法,將血液直接采集到預(yù)先填充有分離介質(zhì)和抗凝劑的CPT單核細(xì)胞準(zhǔn)備管中。
避免污染:在采集過程中,要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,避免樣本受到污染。
3.混合均勻
翻轉(zhuǎn)采血管:輕柔翻轉(zhuǎn)采血管數(shù)次,使血液與管內(nèi)的分離介質(zhì)和抗凝劑充分混合。這一步驟對于后續(xù)的細(xì)胞分離至關(guān)重要。
4.離心分離
設(shè)置離心參數(shù):將混合后的采血管置于適合的離心機(jī)中,按照推薦的離心條件(如速度和時間)進(jìn)行離心。
觀察分層現(xiàn)象:離心完成后,通過觀察可以看到明顯的細(xì)胞分層現(xiàn)象。紅細(xì)胞和粒細(xì)胞會沉積在底部,而單核細(xì)胞則會位于中間層。
5.細(xì)胞收獲
吸取單核細(xì)胞層:使用無菌注射器或移液管小心地吸取位于中間層的單核細(xì)胞層,并轉(zhuǎn)移至新的無菌容器中進(jìn)一步處理。
避免交叉污染:在吸取過程中,要盡量避免觸碰到其他細(xì)胞層,以防止交叉污染。